Rosetta-gami (DE3) pLysS大肠杆菌表达菌

基因型：

Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522：：Tn10 trxB pLysSRARE (CamR, KanR, StrR, TetR)

基本信息：

抗性：Chl+kan+str+tet

培养基：LB

菌株类别：大肠杆菌

培养条件：37℃，有氧，LB

质粒转化：42℃热激

保存方式：20%甘油，-20℃

基本应用：用于蛋白表达

备注：

菌株简介：

Rosetta-gami系列菌株来源于Origami系列宿主菌，该系列菌株的有点除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达，同时含有Rosetta系列菌株中含有的真核细胞稀有密码子。该菌株同时集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的优点。Rosetta-gami(DE3)pLysS系列菌株含有pRARE质粒，能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个真核细胞中的稀有密码子tRNA，能够有效提升真核细胞蛋白的表达水平。pRARE质粒具有氯霉素抗性。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素，卡那，链霉素和四环素四种抗生素抗性。Rosetta-gami(DE3)pLysS被建议使用于含有Bla标记的氨苄抗性表达质粒。当使用pCDF系列载体时，还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。菌株中 的rpsL突变使得该菌株具有链霉素抗性DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。含有pLSs质粒，pLySs质粒能够产生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。