pCold-ProS2质粒 （pCold系列质粒）

启动子： CSPA

复制子： ColE1 ori

质粒分类： 大肠杆菌载体；pCold系列表达质粒

质粒大小： 5025bp

质粒标签： ProS2

原核抗性： 氨苄青霉素Amp

克隆菌株： DH5α

培养条件： 37℃，有氧，LB

表达宿主： 大肠杆菌

培养条件： 37℃，有氧，LB

5'测序引物： pCold-F： 5-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3

3'测序引物： pCold-R：5-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3
质粒简介：
pCold ProS2 DNA 是一种融合的冷休克表达载体，使用来源于革兰氏阴性菌Myxococcus xanthus中的Protein S作为可溶性标签。这种Protein S存在于粘细菌的孢子衣中，由173个氨基酸残基组成，是一种非常稳定的可溶性蛋白质。将两个Protein S的N-末端结构域串联，再结合ProS2 Tag的作用，就能使融合目的蛋白的稳定性和可溶性得到提高。此外，由于目的蛋白和ProS2-Tag的相互作用性很低，因此可以将二者有效分离。pCold ProS2 DNA Vector在cspA启动子的下游插入了5’非编码区(5’-UTR)、翻译增强元件(TEE)、His-Tag序列、ProS2-Tag和多克隆位点(MCS)。在ProS2-Tag和多克隆位点(MCS)之间主要是HRV3C Protease、Thrombin和Factor Xa的切断位点，用来消除融合蛋白质的标签。此外，在cspA启动子下游还插入了lac operator，可以严格调控目的基因的表达。由于本制品的启动子是大肠杆菌来源的，所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。总之，pCold ProS2 DNAVector提供的冷休克技术，能够促进蛋白质的正确折叠，增加目的蛋白质的可溶性，对于一些棘手的目的蛋白质的表达是一个很好的选择。
质粒图谱：