pLKO.1-Puro质粒

质粒简介：

1. shRNA 克隆：设计靶向目标基因的 shRNA 序列，通过 AgeI/EcoRI 酶切连接到 pLKO.1 puro 载体上。
2. 慢病毒包装：将重组 pLKO.1 puro 与包装质粒（如 psPAX2、pMD2.G）共转染 HEK293T 细胞，收获含 shRNA 的慢病毒颗粒。
3. 细胞感染与筛选：用病毒颗粒感染目标细胞，加入嘌呤霉素筛选，获得稳定敲低的细胞株。

4.pLKO.1 puro 是经过简化的版本（7050 bp），比经典 8.9 kb 的版本更短，可能是部分冗余序列被去除，核心的 shRNA 表达、慢病毒骨架和筛选标记功能完全一致(https://www.kelei-biology.com/product/15917.html)。

 

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