PiggyBac Dual promoter质粒

一   质粒简介：

1.搭配PiggyBac转座酶质粒共转染，可将双启动子控制的整套表达框稳定整合到哺乳动物细胞基因组，经过嘌呤霉素筛选，获得永久稳定表达两个外源基因的细胞系，远优于瞬时转染的短暂表达。
2. 双基因/多基因共表达研究-

方案1：CMV驱动目标功能基因，EF-1α驱动第二个辅助基因（如CRISPR相关元件、伴侣蛋白、亚基）
方案2：利用T2A实现抗性+荧光+目的蛋白三基因共表达，一次完成筛选+示踪+功能研究
3. 基因过表达、基因功能验证
用于体外细胞水平：基因gain-of-function（功能获得）、基因挽救实验、信号通路机制、蛋白互作等分子生物学实验。
4. 细胞筛选与示踪- 嘌呤霉素快速富集阳性细胞
- GFP荧光可实时追踪细胞、分选高表达细胞群，方便下游实验
5. 适配多种细胞体系
相比单启动子载体，EF-1α+CMV组合，在肿瘤细胞、干细胞、原代细胞、难转染细胞中都能稳定高效表达，适用范围极广。
6. 体内动物实验
也可配合转座酶用于体内活体转染、动物水平稳定基因表达、转基因动物构建等研究。

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