EGY48酵母双杂交菌

基因型：

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

基本信息：

培养基：YPDA

菌株类别：酵母菌

培养条件：28℃，有氧，YPDA

质粒转化：电激

保存方式：30%甘油，-20℃

基本应用：用于酵母双杂交

备注：

菌株简介：

EGY48菌株是Clontech公司开发的LexA 系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验；Transformation marker为： his3, trp1, ura3，报告基因为：LEU2；报告基因UAS（上游激活序列）来源于LexA op(x6)，只有当Bait和Prey互作时才能启动LEU2表达 。EGY48-LexA酵母双杂系统系统需要三种质粒配套使用：pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。质粒pLexA的筛选标志为HIS3，用于表达DNA-BD(来自原核的202个氨基酸残基组成的LexA蛋白)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒pB42AD的筛选标志为TRP1，用于表达AD(来自疱疹病毒的88个氨基酸残基组成的B42AD蛋白)与目标蛋白（Prey）的融合蛋白；报告质粒p8op-LacZ的筛选标志为URA3，报告基因为LacZ，报告基因UAS来源于LexA op(x8) ，只有当Bait和Prey互作时才能启动LacZ表达。EGY48菌株可用YPDA在28℃有氧的条件下培养,然后用30%甘油保藏菌种。