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pPIC9k质粒

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kl-zl-0920-01 pPIC9k质粒 NA

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pPIC9k质粒 货号:kl-zl-0920 规格:20ul

启动子: AOX1
复制子: pBR322 ori
质粒分类: 酵母系列,毕赤酵母表达载体
质粒大小: 9276bp
原核抗性: Amp、Kan
筛选标记: HIS4
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 酵母细胞
5'测序引物: AOX5:GACTGGTTCCAATTGACAAGC
3'测序引物: AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT
质粒简介:
pPIC9K载体中存在卡那抗性基因,允许利用卡那抗性在酵母体内筛选多克隆拷贝。1.载体大小9276 bp。2.载体构建过程中,可供使用的单一限制性内切酶位点为 SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I. 3.利用alpha因子分泌信号肽,分泌表达蛋白基因。4.在载体构建过程中,你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。5.毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。6.为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) 7..为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型,KM71中产生His+ MutS基因型) 8.将基因插入GS115的AOX1区域,需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。
质粒图谱:

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