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pCold-GST质粒

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kl-zl-0736-01 pCold-GST质粒 NA

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pCold-GST质粒 货号:kl-zl-0736 规格:20ul

启动子: CSPA
复制子: ColE1 ori
质粒分类: 大肠杆菌载体;pCold系列表达质粒
质粒大小: 5097bp
质粒标签: N-GST, N-HRV 3C蛋白酶切位点,N-His
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: 大肠杆菌
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: pCold Forward: 5-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3
3'测序引物: pCold Reverse 5-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3
备注: pCold-GST载体表达GST融合蛋白,GST标签可以提高目的蛋白的可溶性,提高目的蛋白的纯度。
质粒简介:
pCold GST DNA在冷休克载体的基础上,整合了来源于Schistosoma japonicum的谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases, GST)可溶性标签。通过GST在目的蛋白质N末端的融合表达,可提高融合蛋白质的稳定性和可溶性。本制品在cspA启动子的下游插入了5’非编码区(5’-UTR)、翻译增强元件(TEE)、His标签、GST标签和多克隆位点(MCS)(下图)。此外,在cspA启动子下游还插入了可以严格调控目的基因表达的lac operator。GST标签融合蛋白质可进行高亲和性纯化。在GST标签和多克隆位点(MCS)之间插入了高特异性HRV 3C Protease 的识别序列,可从融合蛋白质中去除标签。HRV 3C Protease的最适温度为4~5℃,可以在温和的条件下进行目的蛋白质的标签去除反应。pCold 系列载体的启动子是大肠杆菌来源的,所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。
质粒图谱:

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