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pAO815质粒

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kl-zl-0189-01 pAO815质粒 NA

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pAO815质粒 货号:kl-zl-0189

质粒类型: 酵母表达载体
表达水平: 高拷贝
启动子: AOX1
克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小: 7709 bp
5' 测序引物及序列: 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´
3' 测序引物及序列: 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
载体抗性: Ampicillin (氨苄青霉素)
筛选标记: HIS4
备注:
插入基因是必需包含起始密码子ATG
质粒简介:

pAO815是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体。

  1. pAO815载体大小为7709 bp。
  2. 在多克隆位点区域,拥有1个单一的限制性酶切位点EcoR I。
  3. 胞内表达。
  4. 载体构建时,需要包含一个ATG启动子,同时需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)
  5. 毕赤酵母中使用HIS4基因筛选。
  6. 将基因插入GS115和KM71的HIS4中,需要使用Sal I或者Stu I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+,KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
  7. 将基因插入GS115的AOX1基因中,也可以使用Bgl II 限制酶线性化质粒,产生的酵母基因型为His+ MutS。
  8. 质粒图谱:
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