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质粒构建服务

2022-08-16

质粒构建服务
一:点突变载体构建   
       柯雷生物针对客户的实验要求,可以对质粒载体进行单个或多个核苷酸突变改造,构建为含有核苷酸/氨基酸点突变的质粒载体。对于一般序列,30 bp范围内的任意碱基突变均按照1次点突变构建服务进行收费。
二:基因克隆载体构建:
       柯雷生物针对客户实验要求,我们可以通过把目的基因插入包含表达元件(启动子、终止子等)及筛选标记(荧光标记、抗性标记等)的质粒骨架中,构建哺乳动物,大肠杆菌等物种的基因过表达质粒载体。
三:质粒构建优势:
(1)涵盖人(33,000)、小鼠(25,000)、大鼠(15,000)等多个种属:
(2)绝大部分cDNA克隆都经过完全测序,可提供详细测序报告;
(3)源于高质量的cDNA文库,外源片段插入区为全长转录本
(4)保证ORF区序列的准确性
(5)所有cDNA克隆的基因全为NCBI标准
(6)克隆易于在大肠杆菌保存和扩增基因
(7)拥有现成基因库构建方便快捷,价格低。由于基因类别多网站上传速度慢信息不全,查询不到的可以咨询网站相关客服人员:qq:1722105945   微信:13248085519 
          电话:13248085519   18116431857   021-57880797
四:构建优势:
  ①表达时间快,导入细胞后约24小时可观察到目的基因表达;
  ②构建技术简单,成本低,价格低。
  ③过表达载体库丰富,并且过表达的标记丰富
  荧光标记:GFP、mCherry、CFP、BFP、EYFP、mNeonGreen、tdTomato、 mScarlet…
  标签标记: FLAG、 HA 、Myc、His tag…
  抗性标记:Puro、Neo、Hygro、BSD…
五:常用大肠杆菌表达感受态推荐

1、BL21(DE3):常用于非毒性蛋白的高水平表达

2、BL21(DE3)pLysS:用于毒性蛋白的表达

3、BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL:用于富含AT或GC蛋白的表达

4、Rosetta(DE3):补充大肠杆菌缺乏的稀有密码子

5、OrigamiB(DE3):帮助含有二硫键的蛋白正确折叠

6、ArcticExpress(DE3):可以表达适应低温的伴侣蛋白

7、Shuffle T7:帮助含二硫键的蛋白正确折叠


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