pKD3质粒

  • 货号:KZ0095
  • 培养条件:37度
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KZ0095 pKD3质粒

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一质粒简介:

大肠杆菌基因敲除的抗性模板
pKD3 是 λ Red重组系统 中不可或缺的工具质粒,核心用途是为大肠杆菌的基因敲除提供氯霉素抗性筛选标记模板:
1. PCR扩增抗性片段:以pKD3为模板,用含靶基因同源臂的引物扩增“FRT-Cm-FRT”片段;
2. Red重组:将线性片段导入表达Red重组酶(pKD46质粒提供)的大肠杆菌中,通过同源重组替换靶基因;
3. 抗性筛选:利用氯霉素抗性筛选获得阳性重组菌;
4. 抗性去除:导入pCP20质粒表达FLP重组酶,识别FRT位点并切除抗性标记,获得无痕敲除菌株。

5.克隆菌株要求:pKD3必须在pir⁺菌株(如BW25141、DH5α λpir,S17-1λpir)中扩增,否则质粒无法复制;
2. 抗性使用:敲除实验中,筛选重组菌使用氯霉素(通常25 μg/mL),质粒保藏时可同时使用氨苄青霉素(100 μg/mL);
3. 后续处理:抗性切除后需验证基因组上仅保留一个FRT位点,无抗性残留。
 

产品图谱及序列

  • 序列:
  • AGATTGCAGCATTACACGTCTTGAGCGATTGTGTAGGCTGGAGCTGCTTCGAAGTTCCTATACTTTCTAGAGAATAGGAACTTCGGAATAGGAACTTCATTTAAA
  • TGGCGCGCCTTACGCCCCGCCCTGCCACTCATCGCAGTACTGTTGTAATTCATTAAGCATTCTGCCGACATGGAAGCCATCACAAACGGCATGATGAACCTGAAT
  • CGCCAGCGGCATCAGCACCTTGTCGCCTTGCGTATAATATTTGCCCATGGTGAAAACGGGGGCGAAGAAGTTGTCCATATTGGCCACGTTTAAATCAAAACTGGT
  • GAAACTCACCCAGGGATTGGCTGAGACGAAAAACATATTCTCAATAAACCCTTTAGGGAAATAGGCCAGGTTTTCACCGTAACACGCCACATCTTGCGAATATAT
  • GTGTAGAAACTGCCGGAAATCGTCGTGGTATTCACTCCAGAGCGATGAAAACGTTTCAGTTTGCTCATGGAAAACGGTGTAACAAGGGTGAACACTATCCCATAT
  • CACCAGCTCACCGTCTTTCATTGCCATACGTAATTCCGGATGAGCATTCATCAGGCGGGCAAGAATGTGAATAAAGGCCGGATAAAACTTGTGCTTATTTTTCTT
  • TACGGTCTTTAAAAAGGCCGTAATATCCAGCTGAACGGTCTGGTTATAGGTACATTGAGCAACTGACTGAAATGCCTCAAAATGTTCTTTACGATGCCATTGGGA
  • TATATCAACGGTGGTATATCCAGTGATTTTTTTCTCCATTTTAGCTTCCTTAGCTCCTGAAAATCTCGACAACTCAAAAAATACGCCCGGTAGTGATCTTATTTC
  • ATTATGGTGAAAGTTGGAACCTCTTACGTGCCGATCAACGTCTCATTTTCGCCAAAAGTTGGCCCAGGGCTTCCCGGTATCAACAGGGACACCAGGATTTATTTA
  • TTCTGCGAAGTGATCTTCCGTCACAGGTAGGCGCGCCGAAGTTCCTATACTTTCTAGAGAATAGGAACTTCGGAATAGGAACTAAGGAGGATATTCATATGGACC
  • ATGGCTAATTCCCATGTCAGCCGTTAAGTGTTCCTGTGTCACTCAAAATTGCTTTGAGAGGCTCTAAGGGCTTCTCAGTGCGTTACATCCCTGGCTTGTTGTCCA
  • CAACCGTTAAACCTTAAAAGCTTTAAAAGCCTTATATATTCTTTTTTTTCTTATAAAACTTAAAACCTTAGAGGCTATTTAAGTTGCTGATTTATATTAATTTTA
  • TTGTTCAAACATGAGAGCTTAGTACGTGAAACATGAGAGCTTAGTACGTTAGCCATGAGAGCTTAGTACGTTAGCCATGAGGGTTTAGTTCGTTAAACATGAGAG
  • CTTAGTACGTTAAACATGAGAGCTTAGTACGTGAAACATGAGAGCTTAGTACGTACTATCAACAGGTTGAACTGCTGATCTTCAGATCCTCTACGCCGGACGCAT
  • CGTGGCCGGATCTTGCGGCCGCAAAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGA
  • GGCACCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGC
  • TGCAATGATACCGCGAGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGC
  • CTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACG
  • CTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCC
  • GATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGAC
  • TGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAACTTT
  • AAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCACCCAACTGATC
  • TTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCAT
  • ACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGAGCGGATACATATTTGAATGTATTTAGAAAAATAAACAAATAGGGGTTCCGCG
  • CACATTTCCCCGAAAAGTGCCACCTGCATCGATGGCCCCCCGATGGTAGTGTGGGGTCTCCCCATGCGAGAGTAGGGAACTGCCAGGCATCAAATAAAACGAAAG
  • GCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTATCTGTTGTTTGTCGGTGAACGCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAA
  • CGGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAAGCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTGGCCAGTGCCAAGC
  • TTGCATGC

 

启动子 Cat
复制子 R6K
质粒用途 基因编辑
原核抗性 Amp,Chl
克隆菌株 S17-1λpir
培养条件 37度
质粒宿主 大肠杆菌
货号 产品名称 规格 库存 价格 数量 购买
KZ56888 pCDH-U6-RPN1(human)-shRNA5-CopGFP-Puro质粒 100ug

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KZ53106 pCMV-Arf6(mouse)-Neo质粒 100ug

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KZ47347 pCDH-CMV-TERT(human)-3×FLAG-Puro质粒 100ug

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KZ43525 pCMV-3×FLAG-ZDHHC4(human)-Neo质粒 100ug

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KZ43429 plvx-U6-INTS10(human)-shRNA2-EGFP-Puro质粒 100ug

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KZ13211 pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-Il1rl2-shRNA3(rat)质粒 100ug

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KZ9141 pEnCMV-PGAM5-3×FLAG质粒 100ug

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KZ5661 pECMV-Trpc5-m-FLAG质粒 100ug

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NM_001017408-20ul GOPC人cDNA质粒 20ul

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