
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 库存 | 价格 | 数量 | 购买 |
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| KZ0095 | pKD3质粒 | 支 |
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一质粒简介:
大肠杆菌基因敲除的抗性模板
pKD3 是 λ Red重组系统 中不可或缺的工具质粒,核心用途是为大肠杆菌的基因敲除提供氯霉素抗性筛选标记模板:
1. PCR扩增抗性片段:以pKD3为模板,用含靶基因同源臂的引物扩增“FRT-Cm-FRT”片段;
2. Red重组:将线性片段导入表达Red重组酶(pKD46质粒提供)的大肠杆菌中,通过同源重组替换靶基因;
3. 抗性筛选:利用氯霉素抗性筛选获得阳性重组菌;
4. 抗性去除:导入pCP20质粒表达FLP重组酶,识别FRT位点并切除抗性标记,获得无痕敲除菌株。
5.克隆菌株要求:pKD3必须在pir⁺菌株(如BW25141、DH5α λpir,S17-1λpir)中扩增,否则质粒无法复制;
2. 抗性使用:敲除实验中,筛选重组菌使用氯霉素(通常25 μg/mL),质粒保藏时可同时使用氨苄青霉素(100 μg/mL);
3. 后续处理:抗性切除后需验证基因组上仅保留一个FRT位点,无抗性残留。

| 启动子 | Cat |
|---|---|
| 复制子 | R6K |
| 质粒用途 | 基因编辑 |
| 原核抗性 | Amp,Chl |
| 克隆菌株 | S17-1λpir |
| 培养条件 | 37度 |
| 质粒宿主 | 大肠杆菌 |
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 库存 | 价格 | 数量 | 购买 |
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| KZ56888 | pCDH-U6-RPN1(human)-shRNA5-CopGFP-Puro质粒 | 100ug |
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| KZ53106 | pCMV-Arf6(mouse)-Neo质粒 | 100ug |
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| KZ47347 | pCDH-CMV-TERT(human)-3×FLAG-Puro质粒 | 100ug |
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| KZ45299 | pCDH-U6-ELF1(human)-shRNA3-EGFP-Puro质粒 | 100ug |
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| KZ43525 | pCMV-3×FLAG-ZDHHC4(human)-Neo质粒 | 100ug |
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| KZ43429 | plvx-U6-INTS10(human)-shRNA2-EGFP-Puro质粒 | 100ug |
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| KZ27201 | pIN-III-ompA3质粒 | 100ug |
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| KZ13211 | pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-Il1rl2-shRNA3(rat)质粒 | 100ug |
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| KZ9141 | pEnCMV-PGAM5-3×FLAG质粒 | 100ug |
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| KZ5661 | pECMV-Trpc5-m-FLAG质粒 | 100ug |
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| NM_001017408-20ul | GOPC人cDNA质粒 | 20ul |
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