咨询热线:13248085519 , 021-57880797
网站公告:
新闻资讯

24小时全国服务热线

132 4808 5519 021-57880797

如果您有任何疑问或是问题,请随时与我们联系

查看联系方式>>
新闻资讯 当前位置:主页 > 新闻资讯 >

免疫沉淀技术

时间:2017-12-17 21:54    点击量:

免疫沉淀技术  :

一般实验过程
1、先离心沉淀细胞,加入适量IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂);组织则剪取0.1g左右大小,加入适量IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4℃裂解30min, 12,000g离心30 min后取上清;
2、取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液,4℃缓慢摇晃孵育过夜;
3、取10μl protein A 琼脂糖珠,用适量裂解缓冲液洗3 次,每次3,000 rpm离心3 min;
4、将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育2-4h,使抗体与protein A琼脂糖珠偶连;
5、免疫沉淀反应后,在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×SDS 上样缓冲液,沸水煮5分钟;
6、SDS-PAGE, Western blotting或质谱仪分析。
样品要求
1、客户需提供待检测样品、免疫沉淀用抗体及检测用抗体。
2、待检测样品可以是直接的待检测蛋白样品,细胞、组织或细菌样品,但需收取蛋白抽提费用。
3、普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品,但也宜用新鲜的蛋白样品为佳。
免疫沉淀是根据抗原抗体结合原理,使用特异性的抗体以及protein A/G-coupled agarose beads从细胞或者组织裂解物标本中特异性纯化目的蛋白的方式。

【返回列表页】
点这里给我发消息 点这里给我发消息
地址:上海市金山区枫泾镇环东一路65弄6号  电话:132 4808 5519, 181 1643 1857   邮箱 :shklsw69@163.com
2017-2018 柯雷生物 版权所有沪ICP备16039106号-2  
这里是您的网站名称