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HE染色

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学常规制片中基本的染色方法,应用极其广泛。苏木 精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察,可确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的,在HE染色的组织切片中细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析


实验介绍

        苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

HE染色是组织切片染色的一种,有利于观察组织的形态学特征。
 
首先,HE染色也和免疫组化一样,需要将组织切片进行脱蜡水化,所以步骤是这样的:
 
脱蜡之前需将玻片在烤箱中烤10分钟(60度),然后按通风橱里溶液的顺序,依次是二甲苯I浸泡10分钟,二甲苯II浸泡10分钟,二甲苯III浸泡10分钟,无水乙醇I浸泡5分钟,无水乙醇II浸泡5分钟,90%乙醇浸泡5分钟,80%乙醇浸泡5分钟,75%乙醇浸泡5分钟,之后转移到蒸馏水中在摇床上摇5分钟,换PBS摇5分钟。
 
上面的步骤是相同的,接下来就是不同的了。
 
苏木素染色5-10mins;
 
流水冲洗1min;
 
1%的盐酸酒精1-3s;
 
流水冲洗5-10s;
 
80%的酒精2-3s;
 
90%的酒精2-3s;
 
95%的酒精2-3s;
 
无水乙醇  2-3s;
 
二甲苯1 1-2mins;
 
二甲苯2 1-2mins;
 
封片观察

 

实验流程



 


 

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